尊龙凯时的人员需要注意,该试剂盒仅供科学研究使用,不可用于医学诊断。以下为人白介素23(IL-23)ELISA试剂盒的使用说明及检测原理。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被抗体的微孔中,依次加入样品、标准品及HRP标记检测抗体。经过温育及彻底洗涤后,使用TMB底物显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,随后在酸性环境中转换为最终的黄色。颜色的深浅与样品中的adropin(AD)浓度呈正相关。法通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),并计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,避免细胞刺激,血液收集后进行3000转的离心10分钟,迅速分离血清和红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟后收集上清。
3. 细胞上清液:进行3000转离心10分钟,去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与生理盐水混合并捣碎,经过3000转离心10分钟后取上清。
5. 保存:如果样品在收集后未及时检测,请分装为一次用量并于-20℃冷冻,避免反复冻融。样品需在室温下均匀解冻。
操作注意事项
本试剂盒的组成包括标准品(S0-S5),浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:将蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水进行稀释。
洗板方法与操作步骤
根据标准品浓度与OD值绘制标准曲线,使用Excel绘图功能构建线性回归曲线,通过曲线方程计算各样本的浓度值。
免责声明
使用尊龙凯时提供的试剂盒时,请务必遵循说明,确保实验数据的准确性与可靠性。